脫硫生物素-二聚乙二醇-酰胺-二苯并環(huán)(Desthiobiotin-PEG2-CONH-DBCO)是一種重要的多功能生物偶聯(lián)試劑。
化學結(jié)構與組成:由脫硫生物素、二聚乙二醇(PEG2)、酰胺鍵(CONH)和二苯并環(huán)辛炔(DBCO)組成。脫硫生物素是生物素的類似物,缺少硫原子,但仍能與鏈霉親和素和親和素等蛋白質(zhì)特異性結(jié)合;二聚乙二醇是由兩個乙二醇單元組成的柔性鏈段,可增加分子的水溶性;酰胺鍵起到連接不同結(jié)構單元的作用,影響分子的穩(wěn)定性和化學反應性;二苯并環(huán)辛炔是具有反應活性的基團,能與疊氮基團發(fā)生點擊化學反應。
物理性質(zhì):通常為白色或無色固體粉末。其分子量為 631.77,分子式為 C35H45N5O6。由于含有二聚乙二醇部分,在水中有一定的溶解性,同時在二甲基亞砜、N,N - 二甲基甲酰胺等有機溶劑中也有較好的溶解度。
化學性質(zhì):二苯并環(huán)辛炔能與含有疊氮基團的化合物發(fā)生高效的點擊化學反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構。酰胺鍵可以在一定條件下發(fā)生水解反應,生成相應的羧酸和胺,也可參與縮合反應形成新的酰胺鍵。脫硫生物素能與親和素、鏈霉親和素等蛋白質(zhì)高親和力、特異性結(jié)合。
合成方法:通常先將脫硫生物素的羧基通過 NHS 或 EDC 等活化試劑轉(zhuǎn)化為活性酯,然后使用 H2N-PEG2-COOH 作為連接臂,兩端分別與脫硫生物素和二苯并環(huán)的氨基反應,二苯并環(huán)部分需預先修飾為氨基或羧基衍生物,最后通過 HATU 或 PyBOP 等縮合劑將上述模塊通過酰胺縮合反應連接起來。
應用領域:在生物標記與檢測中,可利用脫硫生物素與鏈霉親和素的高親和力,用于 ELISA、免疫熒光等檢測技術中標記生物分子;在藥物遞送系統(tǒng)中,二聚乙二醇增強水溶性,二苯并環(huán)結(jié)構可負載疏水藥物,形成靶向納米載體;在蛋白質(zhì)工程中,可作為蛋白質(zhì)交聯(lián)劑或定點修飾工具;在材料科學中,二苯并環(huán)的剛性結(jié)構可用于構建功能化高分子材料。
儲存條件:建議儲存在 - 20℃的低溫條件下,避光、避濕保存,避免頻繁的溶解和凍干,以保持其穩(wěn)定性和活性。
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