Biotin-HPDP（生物素-二硫吡啶）是一種巰基反應(yīng)性的生物素化試劑，以下是對其的詳細(xì)介紹：

一、基本信息

• 中文名稱：生物素-二硫吡啶

• 英文名稱：Biotin-HPDP

• CAS號：129179-83-5

• 分子式：C24H37N5O3S3

• 分子量：539.77

• 外觀：白色固體

• 溶解性：水不溶性，需溶于二甲基亞砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF）等有機(jī)溶劑后，再稀釋于水性緩沖液中使用。

結(jié)構(gòu)式：

二、結(jié)構(gòu)組成

Biotin-HPDP由三部分共同組成：

• 雙環(huán)生物素環(huán)結(jié)構(gòu)：作為生物素的核心部分，具有與親和素/鏈霉親和素的高親和力。

• 附著在生物素戊酸側(cè)鏈上的1,6-二氨基己烷：作為連接臂，增加生物素與巰基反應(yīng)性基團(tuán)之間的距離，減少空間位阻。

• 側(cè)鏈末端的巰基反應(yīng)性基團(tuán)（吡啶基二硫化物）：能夠與蛋白或其他分子上的游離巰基（-SH）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的二硫鍵，并釋放吡啶-2-硫酮。

三、反應(yīng)特性

• 反應(yīng)活性：Biotin-HPDP末端的吡啶基二硫化物能夠與蛋白或其他分子上的游離巰基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的二硫鍵。

• 可逆性：形成的二硫鍵可被還原劑（如二硫蘇糖醇，DTT）裂解，釋放原始未修飾的生物分子，適用于需要回收原始分子的實(shí)驗(yàn)。

• 反應(yīng)條件：在pH 6.5至7.5的緩沖液（如PBS）中反應(yīng)效果較佳。避免使用含硫醇或二硫化物還原劑的緩沖液，以免干擾反應(yīng)。反應(yīng)溫度通常為室溫或25℃，反應(yīng)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整（如90分鐘至數(shù)小時(shí)）。

四、應(yīng)用優(yōu)勢

• 長側(cè)鏈設(shè)計(jì)：使生物素標(biāo)記的分子能夠更好地與親和素（avidin）或鏈霉親和素（streptavidin）探針結(jié)合，提高檢測靈敏度。

• 膜滲透性：Biotin-HPDP是一種膜滲透性試劑，可用于需要回收原始生物分子的標(biāo)記和親和純化。

• 標(biāo)記效率高：由于長側(cè)鏈減少了空間位阻，Biotin-HPDP的標(biāo)記效率較高。

五、操作注意事項(xiàng)

• 溶解方法：溶解時(shí)可用37℃加熱試管并在超聲波水浴中震動(dòng)片刻，以促進(jìn)溶解。

• 儲存條件：本品應(yīng)密封避光，儲存于陰涼、干燥、通風(fēng)處。避免頻繁解凍，建議分裝后-20℃以下冰凍保存。

• 安全防護(hù)：操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡，避免直接接觸皮膚或眼睛。廢棄物需按實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范處理。

• 純化步驟：反應(yīng)后需通過透析、超濾或柱層析等方法去除未結(jié)合的Biotin-HPDP，避免干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

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